纯氟（fú）油Fluo-Oil 135(氟油3M Novec HFE7500电子（zǐ）氟化液的替（tì）代品)

Fluo-Oil 135（简称FO135） 是（shì）一（yī）种纯氟化油，可用于（yú）替（tì）换氟油3M Novec HFE7500电子氟化液（yè）。 Fluo-Oil 135氟油的（de）化（huà）学和物理化学（xué）性质与3M Novec HFE7500 相似，如下（xià）表（biǎo）所示（shì）:

优势

生物相（xiàng）容性、可重复（fù）性（xìng）和稳定性。

如何使用？

氟（fú）油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面活性剂或已（yǐ）经用（yòng）Fluo-Oil 135油稀释（shì）的表面活性剂。

（由于FluoSurf Neat表面活性剂是一（yī）种PFPE-PEG结构的复杂高效纯表面活性剂，因为类似于PFPE-PEG结（jié）构的纯表面活性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两嵌段或三嵌段表面活性剂，Surf 含氟（fú）表面（miàn）活性（xìng）剂等（děng），基本上都可以使用纯氟油Fluo-Oil 135进行稀释。稀释（shì）的浓度从（cóng）0.2%到12%之间（jiān）。）

保存

室温下避光（guāng）保存

安全注意事项

● 避免吸入、摄入和接触皮肤和眼（yǎn）睛

● 穿戴（dài）耐化学腐蚀的个人（rén）防（fáng）护装备

● 戴上合适的手套（tào）

● 穿合适的（de）防护服

● 戴侧护（hù）罩的安（ān）全眼镜

与3M HFE7500油产生液滴性能的测（cè）试比较

分别（bié）用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟（fú）化油稀释FluoSurf neat表面活性剂，得到4w/w%的质量浓度。

水（shuǐ）滴产生或油包水（shuǐ）液滴（dī）产生的两相流速：

油相流（liú）速为300μL/hr，水相流（liú）速为100μL/hr。

水相为PBS溶液或（huò）100μM荧光素的PBS溶液（用于测（cè）试（shì）液滴（dī）的泄露）

倒置显微镜观（guān）察和Image J软件（jiàn）分（fèn）析。

一、液滴尺（chǐ）寸及其分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油（yóu）中，产生（shēng）相似尺寸的水（shuǐ）滴。在既（jì）定流速参数下，液滴的平均直径（jìng）为110μm。液滴尺寸的（de）CV分（fèn）别为2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油）。

二、液滴稳（wěn）定性

大（dà）多数研究团队使用液滴微流体进行细胞封装或 PCR 应用（yòng）。 因此（cǐ），需要通过 PCR 的加热循环以及（jí）在 37°C 下长期孵育来产（chǎn）生稳定的液滴。 表面活性剂的选择至关重要，但选（xuǎn）择油同样重要，以确保可重复（fù）的实验以（yǐ）及单分散液（yè）滴群的生成和保存（cún）。

分（fèn）别从三个方面测试液滴的稳定性：一是把液滴（dī）重新注入到玻璃观察（chá）腔室内；二是经典的（de）PCR热循环过程，循环（huán）过程30次（cì），每次热循环为98°C运行10s, 50°C运行5s, 72°C运行（háng）10s；三（sān）是置于37℃的培养箱（xiāng）内放置3天。对1万个（gè）液滴进行分析。

无论是在 Novec™ HFE 7500 还是 Fluo-Oil™ 135 中形（xíng）成 FluoSurf™ 稳定（dìng）的液滴，在 PCR 加热循（xún）环（huán）后或在 37°C 孵育 3 天后，液滴平（píng）均尺寸（cùn）在生成（chéng）时保持不变 [约 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴（dī）种群仍然是单分散的。 根据统计分析，计算出（chū）在加热循环（huán）后，只有 5% 的整（zhěng）体液滴的大小与平（píng）均初始（shǐ）液滴直径的差异超过（guò） 10%。

将氟（fú）化油从 Novec™ HFE 7500 切换到 Fluo-Oil™ 135 对液滴稳（wěn）定性没有影响。

三、液滴内的分子滞留

基于液滴的化学（xué）或生化分析依赖于试剂在（zài）单个液（yè）滴中保持隔（gé）离。 泄漏到连续相和液滴之间的（de）交（jiāo）换，即使很（hěn）低，也会（huì）影响结果的完整性，因此，分子保留是选（xuǎn）择氟化油时（shí）要考虑（lǜ）的重要参数。 众所（suǒ）周知，氟化油会限（xiàn）制液滴之间的分子交换，因此应验证切换油（yóu）的（de）影响（xiǎng）。

同时生成两种（zhǒng）油（yóu）包水乳（rǔ）液[“空”（负载 PBS）和（hé）“满”（负载荧（yíng）光素）液滴]，一次使（shǐ）用 Novec™ HFE7500，然后使（shǐ）用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相。 两种混（hún）合（hé）物，每一种都包含两个种群，在 37°C 下孵（fū）育，并在不同的时间点拍摄（shè）照片（piàn）。 使用（yòng） ImageJ 软件对液滴内荧光强度的演变进（jìn）行了统计定量分析（xī）。

上图显示了两个群体之间平（píng）均荧光强（qiáng）度差异的演变（biàn）（染料（liào）加载和空液（yè）滴）以及在初始时间点和 48 小（xiǎo）时后相关的荧光和明场图片。

在 24 小时的过程中，两种氟化油产生的液（yè）滴中荧光素的泄漏率相似（约 15% 泄（xiè）漏），并且（qiě）在 Fluo-Oil™ 135 中产生液滴的情（qíng）况下（xià）保持恒定 3 天。相反，在 24 小时（shí）后， Novec™ HFE7500 中液滴的泄漏继续减少并达（dá）到 30% 左右。 这种较长孵育（yù）时间的较（jiào）差（chà）保（bǎo）留（liú）性能（néng）可归因于后（hòu）一种油（yóu）的粘度略低，加速了液滴之间更快的分子（zǐ）交换。

结论（lùn）

对于基（jī）于液滴的微流体应（yīng）用，从一种氟化油类型切换到另一种（zhǒng）类（lèi）型可能会对微（wēi）流体实验的（de）过程产生重大影响，尤（yóu）其是对液滴（dī）的有效生成产生重大影（yǐng）响。 在氟油3M Novec™ HFE7500电子氟化液 和 氟油（yóu）Fluo-Oil™ 135 的情况（kuàng）下，已证实更换（huàn）这两种氟化油对实验条件和结果没有影响。 当使用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相时，甚至（zhì）可以观察到荧（yíng）光素在液滴（dī）内的更好保留。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是用（yòng）于液（yè）滴（dī）微流体应用的3M Novec™ HFE7500 氟油 的有效（xiào）替（tì）代品。